受体破坏酶(RED)对禽流感检测方法研究进展的意义
什么叫受体破坏酶?
红血球或寄主细胞的表面有对应于病毒的受体,病毒以酶破坏受体,然而伯内特(F.M.Burnet)在霍乱菌的培养滤液中发现一种与病毒同样可破坏受体的酶,称此酶为RDE。其后明确它是神经氨酸苷酶。
受体破坏酶(RED)对禽流感检测方法研究进展的意义?
目的:检测受体破坏酶(RDE)对人血清及鸡血清中非特异性抑制素的清除作用.
方法:常规制备正常人、鸡以及流感病毒感染者的血清各30份,应用血凝抑制试验,测定RDE处理前后人及鸡血清抗体效价的变化.
结果:30份正常鸡血清在RDE处理前后其抗体效价均<10;30份正常人血清,处理前有5份抗体效价是20,12份10,处理后30份抗体效价均<10.30份感染者血清使用RDE处理后抗体效价均有不同程度降低.
结论:鸡血清中非特异性抑制素含量低,RDE处理与否对其作用不大.而人血清中的非特异性抑制素会对实验结果造成影响.因此进行流感病毒血清抗体检测时特异性鸡抗血清可不用RDE处理,而人血清需RDE处理,以确保实验结果的准确性.
一般情况下,新分离毒株要先鉴定出特异性NP或MP抗原型(用AGP)确定禽流感病毒,再做HA亚型的鉴定。
现已有人采用改进HA试验方法,称为HA加敏法。该法测抗体效价比常规法高2-4倍,若抗原用乙醚裂解,其敏感性比常规法高4~6倍,但观察时以30分钟内为好,否则易出现假阳性。另外,还应注意在HI试验时,应先除去非特异性凝集反应。许多禽类血清都含有非特异性因子,能和红细胞表面受体竞争性地作用于病毒表面的血凝素而发生非特异性凝集反应。通常用受体破坏酶(RED)即霍乱菌培养液处理法或高碘酸钠法制备血清。
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