质粒中提试剂盒QIAGEN Plasmid Midi Kit
纯化至多100 µg转染级质粒或柯斯质粒DNA
1.纯化得到相当于2次CsCl梯度离心得到的DNA纯度
2.高产量质粒DNA
3.经济的制备方法
4.使用LyseBlue,获得最佳的裂解效果和最大的DNA产量
QIAGEN Plasmid Kits通过重力流阴离子交换柱纯化转染级质粒DNA。该试剂盒可纯化获得至多100 μg质粒DNA。离心获得澄清的裂解产物和异丙醇沉淀。
详细信息:
性能
QIAGEN Plasmid Midi Kits利用重力流QIAGEN-tip 100阴离子交换柱高效纯化质粒DNA。只需25–100 ml培养基,即可纯化获得多达100 µg的高拷贝质粒DNA。(培养容量取决于质粒拷贝数、插入片段大小、宿主菌株和培养基。)QIAGEN Plasmid Kits纯化的质粒DNA适合多种应用,如:转染、克隆、测序和体外转录。
原理
QIAGEN-tips内独特的阴离子交换树脂专为纯化核酸设计。它独特的分离特性,使纯化的DNA的纯度相当于连续2次CsCl梯度离心得到的DNA纯度。预装的QIAGEN-tips利用重力流原理工作,缩短了纯化质粒的手动操作时间。整套QIAGEN质粒纯化体系避免使用苯酚、氯仿、溴化乙锭和CsCl等有毒物质,减小对使用者和环境的危害。
操作流程
使用QIAGEN Plasmid Kits,细菌裂解物通过离心澄清。澄清后的裂解物上样到阴离子交换柱,质粒DNA在适当的低盐条件和pH条件下与树脂进行选择性结合。RNA、蛋白质、代谢产物和和其它低分子量杂质用中盐洗涤液去除,用高盐缓冲液洗脱纯质粒DNA。纯化得到的DNA用异丙醇沉淀浓缩和脱盐后,通过离心收集。
应用
QIAGEN Plasmid Kits纯化得到的质粒DNA适合多种应用,如:
1.转染
2.克隆
3.PCR
4.体外转录
技术参数:
特点 |
参数 |
Applications |
Transfection, cloning, sequencing, capillary sequencing etc. |
Culture volume/starting material |
25–100 ml culture volume |
Plasmid type |
High-copy, low-copy, cosmid DNA |
Processing |
Manual (centrifugation) |
Samples per run; throughput |
1 sample per run |
Technology |
Anion-exchange technology |
Time per run or prep per run |
150 min |
Yield |
<100 µg |
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