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质粒中提试剂盒QIAGEN Plasmid Midi Kit

发布时间:2014-2-22 12:35:08      浏览次数:

纯化至多100 µg转染级质粒或柯斯质粒DNA

1.纯化得到相当于2次CsCl梯度离心得到的DNA纯度

2.高产量质粒DNA

3.经济的制备方法

4.使用LyseBlue,获得最佳的裂解效果和最大的DNA产量

QIAGEN Plasmid Kits通过重力流阴离子交换柱纯化转染级质粒DNA。该试剂盒可纯化获得至多100 μg质粒DNA。离心获得澄清的裂解产物和异丙醇沉淀。

详细信息:

性能

QIAGEN Plasmid Midi Kits利用重力流QIAGEN-tip 100阴离子交换柱高效纯化质粒DNA。只需25–100 ml培养基,即可纯化获得多达100 µg的高拷贝质粒DNA。(培养容量取决于质粒拷贝数、插入片段大小、宿主菌株和培养基。)QIAGEN Plasmid Kits纯化的质粒DNA适合多种应用,如:转染、克隆、测序和体外转录。


原理

QIAGEN-tips内独特的阴离子交换树脂专为纯化核酸设计。它独特的分离特性,使纯化的DNA的纯度相当于连续2次CsCl梯度离心得到的DNA纯度。预装的QIAGEN-tips利用重力流原理工作,缩短了纯化质粒的手动操作时间。整套QIAGEN质粒纯化体系避免使用苯酚、氯仿、溴化乙锭和CsCl等有毒物质,减小对使用者和环境的危害。

操作流程

使用QIAGEN Plasmid Kits,细菌裂解物通过离心澄清。澄清后的裂解物上样到阴离子交换柱,质粒DNA在适当的低盐条件和pH条件下与树脂进行选择性结合。RNA、蛋白质、代谢产物和和其它低分子量杂质用中盐洗涤液去除,用高盐缓冲液洗脱纯质粒DNA。纯化得到的DNA用异丙醇沉淀浓缩和脱盐后,通过离心收集。

应用

QIAGEN Plasmid Kits纯化得到的质粒DNA适合多种应用,如:

1.转染

2.克隆

3.PCR

4.体外转录

技术参数:

特点

参数

Applications

Transfection, cloning, sequencing, capillary sequencing etc.

Culture volume/starting material

25–100 ml culture volume

Plasmid type

High-copy, low-copy, cosmid DNA

Processing

Manual (centrifugation)

Samples per run; throughput

1 sample per run

Technology

Anion-exchange technology

Time per run or prep per run

150 min

Yield

<100 µg