联系我们   Contact
搜索   Search
你的位置:首页 > 新闻动态 > 行业新闻

血液组织DNA提取试剂盒(DNeasy Blood & Tissue Kit)技术简介

发布时间:2015-7-14 15:21:17      浏览次数:
 简介:

从动物血液和组织、细胞、酵母、细菌或者病毒中纯化总DNA

1.为各种类型样本提供标准化的纯化方法

2.即使是特殊类型起始样本也可以获得高产量DNA

3.高品质DNA

4.经过优化的操作方法适合处理多种起始样本

5.可选择离心柱方式或96孔板高通量方式

DNeasy Blood & Tissue Kit采用基于硅胶膜技术的离心柱或96孔板方式快速方便的纯化DNA。大多数样本可直接用蛋白酶K消化处理,无需机械破碎,减少了手动操作时间。为特殊样本提供优化的纯化方法,获得高重复性、高纯度的DNA,用于生物研究、基因型分析和兽医病理研究。DNA纯化流程可以使用DNeasy Blood & Tissue Kit,在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动化进行。

详细信息:

性能

高效的DNeasy Blood & Tissue操作流程能够从动物血液和组织样本中纯化大量的总DNA。优化的实验方案可确保非标准样本的高产量,如动物毛发和培养细胞、固定的组织,或者革兰氏阳性和阴性细菌。独特的在线实验方案参考文库,可从酵母、昆虫、毛发和其他类型样本中纯化DNA

使用DNeasy Blood & Tissue Kits从动物组织中纯化的DNA产量

样本来源

样本量

DNAµg

哺乳动物血液

100 µl

3–6

鸟类血液

5 µl

9–40

HeLa细胞

2 x 106

15–25

肝脏

25 mg

10–30

25 mg

15–30

肾脏

25 mg

15–30

脾脏

10 mg

5–30

小鼠尾

1.2 cm(尾部)

10–25

大鼠尾

0.6 cm(尾部)

20–40

猪耳

25 mg

10–30

马毛

10 根毛发

2–4

鱼鳍

20 mg

10–20

鱼卵(鲭鱼)

10 mg

5–10

DNeasy Blood & Tissue Kits简化了从多种样本类型中纯化DNA的流程,包括在生命科学、兽医学和基因分型研究应用中常见的动物种类。纯化得到的DNA不含PCR抑制剂,能在标准多重real-time PCR中进行灵敏的检测。DNeasy Blood & Tissue Kits确保了可靠的实验结果,从转基因小鼠的实验室分析到家畜的育种项目和种系基因分型研究。可以用DNeasy 96 Blood & Tissue Kit方便地扩大常规的检测应用的规模。

原理

DNeasy Blood & Tissue Kit适用于从不同的样本中,包括新鲜或冷冻的动物组织和细胞、血液或者细菌,快速纯化总DNA(如,基因组、线粒体和病原体等)。

DNeasy膜整合了硅胶膜的结合特性,经简单显微离心技术或者QIAGEN 96-Well-Plate Centrifugation System处理即可。在高浓度离液盐的环境中,DNA吸附在DNeasy膜上,可以除去溶液中水合分子的水分。DNeasy Blood & Tissue操作流程中设计的缓冲液条件,旨在使DNA特异性吸附到硅胶膜上,并且优化去除污染物和酶抑制剂。

纯化过程不需要苯酚或氯仿抽提或乙醇沉淀,仅涉及少量手工步骤。这使得DNeasy Blood & Tissue Kits非常适合同时处理多个样本。对于高通量的应用,DNeasy 96 Blood & Tissue Kit能够同时处理96192个样本。

操作流程

可靠的硅胶膜技术,利用便捷的离心柱或96孔板形式,确保了快速可重复的DNA纯化,不再需要有机抽提和乙醇沉淀(参见DNeasy Mini and 96 procedures)。样本首先用蛋白酶K裂解。调整缓冲条件,以提供最佳的DNA结合条件并将裂解物上样到DNeasy Mini离心柱或DNeasy 96孔板上。在离心过程中,DNA选择性地结合到DNeasy膜上,污染物通过。余下的污染物和酶抑制剂将在两个高效的洗涤步骤中被去除。然后,用水或缓冲液将DNA洗脱,待用。  

DNeasy Mini离心柱预装在收集管中,并且单独封存,确保方便和安全。使用DNeasy Mini离心柱的纯化过程可在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动进行。DNeasy 96 Blood & Tissue Kit可使用QIAGEN 96-Well-Plate Centrifugation System96孔板形式进行高通量处理。

应用

DNeasy Blood & Tissue Kits提供高品质DNA,可直接用于多种下游分析,包括:

1.生命科学研究 

2.家畜育种

3.种系基因分型研究 

4.兽医病理分析研究 

5.常规的应用检测 

技术参数:

特点

参数

Applications

PCR, real-time PCR, genotyping

Elution volume

100–200 µl

Format

96-well plate, spin column

Main sample type

Blood, tissue

Processing

Manual

Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein

DNA

Sample amount

100 µl/25 mg

Technology

Silica technology

Time per run or per prep

20 minutes – 1 hour

Yield

6 µg/30 µg