纯化基因组DNA、线粒体DNA、细菌、寄生虫或病毒DNA
1.快速纯化高品质,即用型DNA
2.重复性好,产量高
3.彻底去除污染物和抑制剂
QIAamp DNA Mini Kit使用硅胶膜技术从组织、拭子、CSF、血液、体液或尿液细胞中纯化核酸。组织用酶裂解,离心柱分离过程无需机械匀浆操作,手动操作时间仅为20分钟。QIAamp DNA Mini Kit可在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动纯化DNA。
详细信息:
性能
QIAamp DNA Mini Kit可纯化长达50 kb的DNA片段。这个长度的DNA可完全降解且有最高的扩增效率。获得的核酸或DNA的量取决于样本来源(见表)。
QIAamp样本制备技术是完全经过验证的,纯化所得核酸可用于任何分子实验或其他下游应用,而无侵犯专利的风险。
QIAamp DNA Mini Kit的产量
样品 |
用量 |
总核酸的量(µg)* |
DNA 的量(µg)† |
血液 |
200 µl |
4–12 |
4–12 |
白膜层 |
200 µl |
25–50 |
25–50 |
细胞 |
106 |
20–30 |
15–20 |
肝脏 |
25 mg |
60–115 |
10–30 |
大脑 |
25 mg |
35–60 |
15–30 |
肺 |
25 mg |
25–45 |
5–10 |
心脏 |
25 mg |
15–40 |
5–10 |
肾脏 |
25 mg |
40–85 |
15–30 |
脾脏 |
10 mg |
25–45 |
5–30 |
* 核酸未经RNase处理 。
† 核酸经RNase处理。总核酸的量(µg)*
原理
QIAamp DNA Mini Kit采用快速离心柱或真空操作,简化了从人类组织样本中纯化DNA的过程。无需苯酚-氯仿抽提。DNA特异性结合到QIAamp硅胶膜上,污染物流走。PCR抑制剂,如:二价阳离子和蛋白,可通过两步有效的洗涤被去除,结合在离心柱上的纯DNA可用水或试剂盒中的缓冲液洗脱。QIAamp DNA技术从人组织样本中纯化得到的基因组、线粒体、细菌、寄生虫或病毒DNA,可用于PCR和印迹实验中。
操作流程
试剂盒含有优化的缓冲液,能有效裂解样本,可稳定核酸,并促进DNA选择性结合到QIAamp硅胶膜上。将乙醇加入到裂解物中,并上样到QIAamp离心柱上。洗涤缓冲液用于去除杂质,高纯的即用型DNA可用水或低盐缓冲液洗脱。
组织用酶裂解,无需机械匀质化操作,方便的离心柱过程只需20分钟的手工操作时间(裂解时间取决于样品来源)。样品可用离心处理,或已处理过的血液或其他体液可用QIAvac 24 Plus或QIAvac 6S真空底座处理。此外,严密的裂解过程使得QIAamp DNA Mini Kit非常适合于从细菌或寄生物中纯化基因组DNA。在QIAcube全自动核酸纯化仪上纯化基因组DNA用以减少手动操作时间。
真空处理
可用真空装置替代离心机处理血液或体液,可更快更方便地进行DNA纯化。QIAamp Mini离心柱可在QIAvac 24 Plus真空底座上配合VacValves和VacConnectors使用。在样本流速显著不同时,需使用VacValves以确保一致的真空条件。一次性的VacConnectors用于避免交叉污染。使用VacConnectors,也可使QIAamp离心柱操作在带有QIAvac Luer Adapters的QIAvac 6S上进行。
应用
QIAamp DNA Mini Kit非常适合于从常规人组织样本中纯化DNA,包括:肌肉、肝脏、心脏、大脑、骨髓和其他组织、拭子(口腔、眼睛、鼻子、咽喉和其他)、CSF、血液、体液和尿液细胞。DNA可在20分钟内从多达25 mg的组织或200 µl的液体中纯化,洗脱体积50–200 µl。
技术参数:
特点 |
参数 |
Applications |
PCR, Southern blotting |
Elution volume |
50–200 µl |
Format |
Spin column |
Main sample type |
Whole blood, tissue, cells |
Processing |
Manual (centrifugation or vacuum) |
Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein |
Genomic DNA, mitochondrial DNA, bacterial DNA, parasite DNA, viral DNA |
Sample amount |
200 µl/25 mg/5 x 10e6 |
Technology |
Silica technology |
Time per run or per prep |
20 minutes |
Yield |
4–12 µg |
- 上一篇:从细胞、组织或酵母中纯化至多100 μg的总RNA 2014/2/22
- 下一篇:用分型方法检测溯源副溶血性弧菌 2014/2/22