黄曲霉毒素B1检测卡

广州健仑生物科技有限公司

【原理及用途】

本产品应用竞争抑制胶体金免疫层析的原理制成，用于检测谷物、饲料等样本中的黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1，AFB1）。样本溶液滴入检测卡的加样孔后，样本溶液中的黄曲霉毒素B1与金标抗体相结合，从而阻止金标抗体与纤维素膜上黄曲霉毒素B1偶联物结合。当样本溶液中的黄曲霉毒素B1含量大于检测限时检测线不显色，结果为阳性；当样本溶液中黄曲霉毒素B1含量小于检测限时检测线显紫红色，结果为阴性。

【技术指南】

1、试剂卡灵敏度：2ppb（ng/ml）

    对样本的最终检测限须以试剂卡灵敏度乘以样本处理的稀释比例。

2、样本检测下限：

谷物、饲料、粮油……………10ppb

谷物、饲料（须吹干）………5ppb

【储存及有效期】

 储存于阴凉干燥处（2-30℃），有效期24个月。

【需要设备及耗材】

1、仪器：均质器 、振荡器、离心机、刻度移液管、天平（感量0.01g）

2、微量移液器：单道20µl-200µl，100µl-1000µl

3、试剂：甲醇，正己烷

【样本准备】

1、样本处理前须知：

实验器具必须洁净并使用一次性吸头，以避免污染干扰实验结果。

2、配液：

配液1：样本提取液

    70%甲醇，即V甲醇:V去离子水=7:3。

3、样本前处理步骤：

3.1 谷物、饲料

1）称取2g粉碎样本于离心管中，再根据不同的检出限要求按下表加入样本提取液

振荡5分钟，室温4000转/分离心5分钟。

2）取0.1ml上清，加入0.4ml去离子水，混匀备用。

3.2谷物、饲料（须吹干）

 若要求检测下限为5ppb时，可按如下操作：

1）称取2g粉碎样本于离心管中，加入4ml样本提取液，振荡5分钟，室温4000转/分离心5分钟；

2）取1ml上层液体在50-60℃条件下用氮气或空气吹干；

3）先加入0.25ml 70%甲醇溶解剩下的残留物，剧烈震荡2分钟；再加入1ml去离子水，混匀备用。（注意：这一步甲醇与水的加液顺序不能颠倒）

         稀释倍数：2.5倍     检测下限：5ppb

3.3粮油（菜油、麻油、色拉油、花生油等）

1）称取2g样本于离心管中，再根据不同的检出限要求按下表加入样本提取液

然后加入8ml正己烷，振荡5分钟，室温4000转/分离心5分钟。

2）去除上层液体，取0.1ml下层液体加入0.4ml去离子水，混匀备用。

【实验步骤】

1、 撕开检测卡铝箔包装袋，取出检测卡，放于平整、洁净的台面上。

2 、用配套吸管吸取已准备好的样本液体，缓慢、逐滴的（应避免泡沫产生）滴加4-5滴（约150ul）到加样孔（S）内。

3 、室温下放置5-8分钟判断结果，超过30分钟的结果无效。

【结果判断】

1.阴性：在观察孔内，只有对照线区（C）出现一条紫红色线。

2.阳性：在观察孔内，检测线区（T）及对照线区（C）同时出现紫红色线。抗体滴度越高，检测线（T）颜色越深。

3.失效：在观察孔内，对照线区（C）不出现紫红色线。

(注: 去离子水、自来水、生理盐水不能作为阴性对照。)

【注意事项】

1、过期或铝箔袋破损的产品，均不可使用。

2、检测卡从冰箱中取出时应恢复到室温后打开，打开的检测卡应尽快使用以免受潮后失效。

3、不要触摸检测卡中央的白色膜面。

4、取液滴管不可混用，以免交叉污染。

5、待检样品溶液需清亮、无混浊颗粒，否则容易导致阻塞、显色不明显等异常现象，从而影响实验结果的判定。

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